CITRATO DE SIMMONS

El citrato de Simmons es medio de cultivo utilizado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la capacidad de usar el citrato como única fuente de carbono y energía.

En el medio de cultivo, el fosfato monoamonico, es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono. El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras del citrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxilico.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Citrato de sodio	2.0	Suspender 24,2 g del medio deshidratado por litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullición durante 1 o 2 minutos. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar en posición inclinada.
Cloruro de sodio	5.0
Fosfato dipotásico	1.0
Fosfato monoamónico	1.0
Sulfato de magnesio	0.2
Azul de bromotimol	0.08
Agar	15.0
pH final: 6.9 ± 0.2

INOCULACION

Inocular el tubo con agar Citrato de Simmons realizando siembra por estria tomando una colonia del microorganismo en estudio.  Este se debe incubar a 37ºC por 24 horas o 48 horas , o maximo hasta cuatro dias, , también se puede servir en placa.

RESULTADOS

Positivo: Crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad.

Negativo: El medio permanece color verde ya que no hay desarrollo bacteriano.

Si se utiliza un inoculo muy denso puede arrojar falsos positivos, ya que el pico cambiara del verde, a amarillo-amarronado.

PRACTICANDO CON  EL CITRATO SIMMONS

*Primero pesamos 1.21g del agar.

*Después lo diluimos en 100ml de agua en el matraz y lo agitamos vigorosamente.

*Se coloca en la parrilla de calentamiento para dejar que hierva, pero sin dejar de agitar.

*Después que rompa el hervor, hay que dejarlo durante un minuto es esa etapa.

*Posteriormente se baja, y se sirve, ya sea en tubo o en caja de petri.

*Después se incuba la bacteria, y se incuba, ya etiquetada.

Nosotros incubamos una muestra de baño, y aqui  mostraremos nuestro resultado.

Nuestro resultado fue positivo lo que nos quiere decir que si hay algún tipo de enterobacteria es nuestra muestra, ya que el medio de torno a azul, pero no presento crecimiento bacteriano, el medio se torno a alcalino, ya que el medio normal es ácido. Aunque cabe destacar que la prueba también es positiva si no hay color azul en el medio, pero si hay crecimiento bacteriano en las estrías.